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艾滋病检测的具体步骤是什么

2025年10月15日 16:14:59
病情描述:

艾滋病检测的具体步骤是什么

医生回答(1)
  • 叶峰
    叶峰主任医师

    西安交通大学第一附属医院 向他提问

    艾滋病检测样本有血液、唾液、尿液等,血液采集需无菌操作,特殊人群有不同采集方式;初筛酶联免疫吸附试验包括样本处理、抗原抗体反应、酶标记物反应、显色反应,快速检测看试纸条带;初筛阳性需用免疫印迹法确证,结果阳性确诊阴性排除;核酸检测可用于窗口期,能早期检测病毒核酸,高危初筛阴性高度怀疑人群可考虑,如孕妇高危应尽早检测以采取母婴阻断。

    一、样本采集

    艾滋病检测的样本采集方式主要有血液、唾液、尿液等。以血液样本为例,通常采用静脉采血的方式,需使用无菌采血针和采血管,严格按照无菌操作流程采集,避免污染样本。对于特殊人群如孕妇,可采集静脉血或末梢血进行检测;使用唾液样本检测时,需按照特定的唾液采集装置说明书操作,确保采集的唾液量符合要求;尿液样本检测则需使用专用的尿液采集容器,保证尿液样本无杂质干扰。

    二、初筛试验(以酶联免疫吸附试验为例)

    1.样本处理:将采集的血液样本离心分离血清,然后将血清加入酶联免疫吸附试验的反应板孔中,反应板预先包被有艾滋病病毒抗原。

    2.抗原抗体反应:样本中的艾滋病病毒抗体(若存在)会与反应板上的抗原结合,形成抗原-抗体复合物。

    3.酶标记物反应:加入酶标记的二抗,与已结合的抗原-抗体复合物结合,形成抗体-抗原-酶标记物复合物。

    4.显色反应:加入酶的底物,酶催化底物发生显色反应,颜色深浅与样本中艾滋病病毒抗体的浓度成正比。通过酶标仪检测吸光度值,与临界值比较,判断样本初筛结果是否为阳性。若为快速检测(如胶体金法),则根据试纸条上的显色条带判断结果,出现特定条带组合则提示阳性。

    三、确证试验

    初筛试验结果阳性时,需进行确证试验,常用免疫印迹法。将样本点加在硝酸纤维素膜上,膜上预先固定有艾滋病病毒的多种特异性抗原带。样本中的抗体与膜上的抗原带结合,再加入酶标记的二抗,最后加入底物显色,根据膜上出现的条带情况判断是否为艾滋病病毒抗体阳性。若确证试验结果为阳性,可确诊为艾滋病病毒感染;若为阴性,则可排除艾滋病病毒感染。

    四、核酸检测

    核酸检测可用于艾滋病窗口期的检测,步骤为:采集样本后提取病毒核酸,使用聚合酶链式反应(PCR)技术扩增病毒核酸片段,通过荧光定量PCR等方法检测核酸的存在。核酸检测灵敏度高,能在感染早期检测到病毒核酸,对于窗口期的个体检测有重要意义。特殊人群如近期有高危行为且初筛阴性但高度怀疑感染的人群,可考虑进行核酸检测以尽早明确是否感染。例如,孕妇若有高危行为,应尽早进行核酸检测,以便及时采取母婴阻断措施,降低胎儿感染风险。

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