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核酸检测方法

2025年12月16日 23:51:38
病情描述:

核酸检测方法

医生回答(1)
  • 余超
    余超副主任医师

    中山大学附属第三医院 向他提问

    实时荧光定量PCR法利用荧光信号实时监测PCR扩增进程并借特异性探针精准定量,灵敏度高特异性强,用于精准度要求高的临床诊断及大规模筛查,儿童采样需轻柔,基础病患者检测要关注身体状况;等温扩增法包含环介导等温扩增等技术,可在恒温下扩增,操作简便适基层医疗或现场快速检测场景,儿童及特殊人群检测时简便操作可减复杂设备不适但需采样规范;基因测序法通过测序分析核酸片段明确其序列,用于病原体变异检测等溯源研究,需复杂设备及专业技术人员且检测周期长,儿童及特殊人群无额外特殊准备但结果解读需专业人员结合临床情况。

    一、实时荧光定量PCR法

    实时荧光定量PCR法是当前核酸检测应用广泛的方法。其原理是利用荧光信号实时监测PCR扩增进程,通过特异性探针与目标核酸序列结合,实现对病原体核酸的精准定量检测。该方法灵敏度高,能检测到极低浓度的核酸样本,特异性强,可准确识别特定病原体核酸。例如在新冠病毒检测中,能快速确定样本中是否存在新冠病毒核酸。检测过程需严格把控反应条件,如温度、试剂浓度等,以保障结果的准确性,适用于对检测精准度要求较高的临床诊断及大规模筛查场景。对于儿童,采样时需轻柔操作,安抚其情绪,避免因紧张导致采样不配合;有基础疾病患者检测时,要关注其身体状况,确保采样过程平稳。

    二、等温扩增法

    等温扩增法包含环介导等温扩增(LAMP)等技术。此方法无需高温变性等复杂步骤,可在恒温条件下进行核酸扩增。操作相对简便,适合基层医疗或现场快速检测场景,如在一些医疗资源相对匮乏的地区或应急检测时,能快速初步筛查病原体。但与实时荧光定量PCR法相比,其灵敏度和特异性略有差异。在儿童及特殊人群检测中,等温扩增法的简便操作可减少因复杂设备操作带来的不适,但仍需注意采样规范以保证结果可靠性。

    三、基因测序法

    基因测序法通过对核酸片段进行测序分析来明确核酸序列,可确定病原体的具体基因特征,常用于病原体的变异检测等溯源研究。该方法需复杂设备及专业技术人员,检测周期相对较长。在应用于不同人群时,儿童及特殊人群无需额外特殊准备,但检测结果的解读需专业人员结合临床情况综合分析,以保障检测信息能准确服务于医疗决策。

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