免疫组化是什么问
免疫组化是什么
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免疫组化是一种利用抗体与抗原特异性结合的原理,通过显色或荧光反应在组织切片上定位目标蛋白的技术,广泛应用于疾病诊断、分型及治疗方案选择。
一、核心原理
其核心是抗原抗体特异性结合:将针对特定蛋白(抗原)的抗体(一抗)与组织切片孵育,使抗体识别并结合抗原;再通过二抗(标记酶或荧光素)放大信号,经DAB(棕色显色)或荧光染色定位目标蛋白。适用于石蜡切片或冰冻切片,可在细胞/组织水平可视化蛋白表达。
二、临床应用
肿瘤诊断是核心领域:乳腺癌检测ER/PR(提示内分泌治疗敏感性)、HER-2(指导靶向药物使用);肺癌检测ALK/EGFR(驱动突变初筛)。此外,神经系统疾病(如β淀粉样蛋白定位)、自身免疫病(类风湿关节炎免疫复合物检测)等也依赖其辅助诊断,结果直接影响治疗决策。
三、检测流程
流程严谨标准化:1.样本处理:活检或手术标本经甲醛固定(4℃保存),石蜡包埋或冰冻切片;2.抗原修复:高温或酶消化暴露抗原表位(关键步骤,避免假阴性);3.染色反应:一抗孵育、二抗结合,DAB显色或荧光成像;4.结果判读:病理医师结合形态学与染色强度综合判断。
四、结果解读与意义
结果需结合临床背景:ER/PR阳性乳腺癌适合内分泌治疗,HER-2阳性肺癌优先靶向药物。Ki-67指数高提示肿瘤增殖活跃、预后较差。不同实验室遵循WHO/ASCO判读标准,避免技术差异导致误判,需与病理形态、基因检测互补。
五、特殊人群注意事项
孕妇活检风险极低(诊断必要性优先);过敏体质者(对动物源抗体过敏)需提前告知,避免使用同类抗体;免疫抑制剂使用者(如肾移植后)可能影响免疫复合物定位,需临床评估样本代表性;标本需及时固定,防止抗原降解。
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