真菌感染的诊断问

真菌感染检测需根据感染部位采集相应标本并严格无菌操作，直接镜检用氢氧化钾处理标本观察菌丝或孢子，真菌培养将标本接种特定培养基观察菌落特征，分子生物学检测利用PCR扩增真菌核酸，血清学检测通过检测抗原抗体辅助诊断，儿童采集标本要轻柔，老年人需关注耐受并结合基础状况综合判断。

一、标本采集

根据真菌感染部位不同采集相应标本，如皮肤、指甲感染采集皮屑、痂皮、甲屑等；浅部黏膜感染可取分泌物、痰液等；深部真菌感染可能需采集血液、脑脊液、胸水、腹水等标本。采集时需严格遵循无菌操作原则，避免污染影响检测结果。

二、显微镜检查

1.直接镜检：将标本用10%～20%氢氧化钾溶液处理后镜检，若见菌丝或孢子可初步提示真菌感染。不同真菌形态有差异，如念珠菌可见芽生孢子和假菌丝，曲霉菌可见分隔菌丝等。该方法简便快速，但阳性率受标本采集及检测者经验影响。

三、真菌培养

将采集的标本接种于沙保弱培养基等特定真菌培养基，在适宜温度（一般25～28℃）下培养，观察菌落形态、颜色、生长速度等特征。不同真菌形成的菌落有特异性，如白色念珠菌菌落呈奶油色、表面光滑，曲霉菌菌落呈绒毛状、颜色多样等。通过培养可进一步鉴定真菌种类，是确诊真菌感染的重要依据。

四、分子生物学检测

1.PCR技术：利用聚合酶链式反应扩增真菌特异性核酸序列，能快速、灵敏检测标本中微量真菌DNA或RNA，显著提高真菌感染诊断的灵敏度和特异性，尤其适用于早期或困难样本的检测。例如针对常见致病真菌的特异性引物设计，可精准识别病原菌。

五、血清学检测

通过检测真菌抗原或抗体辅助诊断。如隐球菌感染时，可检测血清或脑脊液中的隐球菌荚膜多糖抗原；曲霉菌感染时，可检测半乳甘露聚糖抗原等。血清学检测对深部真菌感染有一定提示作用，但需结合临床综合判断，因部分检测可能存在假阳性或假阴性情况。

特殊人群注意事项

儿童：采集标本时需特别注意操作轻柔，避免患儿不适，根据儿童年龄和病情选择合适标本采集方式，如婴幼儿血液标本采集需谨慎，防止过度失血影响健康。

老年人：老年人常合并基础疾病，标本采集过程中需关注其身体耐受情况，如血液采集时要注意穿刺部位的压迫时间等，同时在检测结果分析时需结合老年人肝肾功能等基础状况，因为肝肾功能减退可能影响某些检测指标的代谢和解读。