检查真菌感染问

标本采集分感染部位选相应标本如皮肤等用无菌工具采集，深部真菌感染按血液、肺部、中枢神经等分别采集；实验室检测有直接镜检用显微镜观察真菌结构、真菌培养接种特定培养基观察菌落、血清学检测检测真菌抗原抗体、分子生物学检测用PCR等技术检测真菌核酸；特殊人群中儿童采集需家长配合安抚且检测结合临床，老年人关注基础疾病及身体耐受检测结果结合整体健康状况评估。

一、标本采集

（一）根据感染部位选择标本

1.皮肤、毛发、指甲感染：取病变部位的皮屑、毛发或指甲碎屑，采集前用75%酒精消毒局部皮肤，用无菌工具采集标本，确保标本新鲜且无杂菌污染。例如头癣患者需采集病发，用镊子拔取病发，要求病发外观失去光泽、易折断且病发根部有白鞘。

2.深部真菌感染：

血液感染：需在患者发热初期或寒战期，无菌条件下采集静脉血，一般采集2-3套（每套含需氧瓶和厌氧瓶），以提高阳性检出率。

肺部感染：可采集痰液标本，要求患者清晨用清水漱口后深咳，留取深部痰液；或行支气管肺泡灌洗术采集灌洗液，适用于痰液标本检测阴性但高度怀疑肺部真菌感染的患者。

中枢神经系统感染：采集脑脊液标本，通过腰椎穿刺获取，需严格无菌操作，避免污染。

二、实验室检测方法

（一）直接镜检

1.原理：利用显微镜观察标本中是否存在真菌的菌丝、孢子等形态结构。

2.操作：皮肤标本可加10%氢氧化钾溶液处理，氢氧化钾能溶解标本中的角质蛋白，使真菌结构清晰可见，然后在显微镜下观察；毛发标本可直接压片镜检，观察是否有菌丝侵入毛发内部。例如念珠菌感染时可见芽生孢子和假菌丝，曲霉感染可见分支分隔菌丝。

（二）真菌培养

1.原理：将标本接种于特定培养基，使真菌在适宜环境中生长繁殖，从而鉴定真菌种类。

2.培养基选择：根据可能感染的真菌种类选择相应培养基，如沙保弱培养基适用于多数浅部真菌培养，血琼脂培养基适用于深部真菌培养。

3.培养条件：一般需在25-30℃环境下培养，培养时间通常为3-7天，观察菌落形态、颜色、边缘等特征来初步鉴定真菌，如白色念珠菌培养后可见奶油色、表面光滑的菌落。

（三）血清学检测

1.原理：检测患者血清中真菌相关的抗原或抗体。

2.常见检测项目：

隐球菌感染：检测隐球菌荚膜多糖抗原，若抗原阳性提示隐球菌感染可能。

曲霉菌感染：检测半乳甘露聚糖抗原，该抗原在曲霉菌感染早期即可升高，对侵袭性曲霉菌感染有辅助诊断价值。

（四）分子生物学检测

1.原理：通过聚合酶链式反应（PCR）等技术检测真菌核酸，具有高灵敏度和特异性。

2.应用：可快速检测标本中真菌的特定核酸序列，如对怀疑肺孢子菌肺炎的患者，可通过PCR检测肺泡灌洗液中的肺孢子菌DNA，有助于早期诊断。

三、特殊人群注意事项

（一）儿童

1.标本采集时需家长配合安抚儿童，避免因哭闹导致标本污染或采集不顺利，如血液标本采集要选择合适的采血部位和方法，尽量减少患儿痛苦。

2.实验室检测时要考虑儿童的生理特点，如儿童免疫功能相对较弱，真菌感染表现可能不典型，检测结果需结合临床症状综合判断。

（二）老年人

1.老年人若存在基础疾病（如糖尿病、慢性阻塞性肺疾病等），真菌感染风险较高，标本采集时要关注其身体耐受情况，如采血时动作要轻柔，避免加重老年人不适。

2.实验室检测结果解读需结合老年人的整体健康状况，因老年人免疫功能下降，可能出现检测结果与临床症状不相符的情况，需多维度评估。