该方法适用于辅酶Q10。
方法原理:避光操作。供试品制成无水乙醇溶液,进入高效液相色谱仪进行色谱分离,用紫外吸收检测器,于波长275nm处检测辅酶Q10吸收值,计算出其含量。
试剂:甲醇、 无水乙醇。
1.仪器
高效液相色谱仪、 色谱柱:(十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂,理论塔板数按辅酶Q10峰计算不低于3000)、紫外吸收检测器。
2. 色谱条件
流动相:甲醇/无水乙醇=50/50。
柱温:室温。
试样制备
1.称取供试品
精密称取该品20mg。
2. 对照品溶液的制备
精密称取辅酶Q10对照品适量,同供试品配制,摇匀,即得。
3. 供试品溶液的制备
将供试品加无水乙醇约40mL在50℃水浴中振摇溶解,放冷后,移置100mL量瓶中,加无水乙醇稀释至刻度,摇匀,即得。
注:“精密称取”系指称取重量应准确至所取重量的千分之一。“精密量取”系指量取体积的准确度应符合国家标准中对该体积移液管的精度要求。
操作步骤:分别精密吸取上述对照品溶液与供试品溶液各20μL注入高效液相色谱仪,用紫外吸收检测器,于波长275nm处测定辅酶Q10的吸收值,计算出其含量。
其他方法
(1)取含量测定项下的供试品溶液,加硼氢化钠50mg,摇匀,溶液黄色消失。(2)在含量测定项下记录的色谱图中,供试品溶液主峰的保留时间应与辅酶Q10对照品主峰的保留时间一致。
(3)该品的红外光吸收图谱应与辅酶Q10对照品的图谱一致。